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木糖駒形氏桿菌的培養(yǎng)和保存方法

更新時間:2025-10-16點擊次數(shù):321
木糖駒形氏桿菌大?。?-2mm;形狀:圓形;邊緣:整齊;透明度:不透明;顏色:淺黃色;隆起度:中間凸起;表面:明亮光滑;質(zhì)地:濕潤粘稠。
操作步驟:
①準備1支含有5~10mL 液體培養(yǎng)基的試管和2個平板;
②安全柜中打開,用酒精燈灼燒頂部,后迅速滴上無菌水使之破裂, 隨后用鑷子將其敲碎;
③吸取0.5mL液體培養(yǎng)基打入凍干管, 充分溶解后重新打回液體試管中,混勻;
④吸取0.2mL菌懸液 打入平板中,涂布均勻,重復(fù)兩次獲得兩個平板;
⑤將液體試 管和平板全部置于上述培養(yǎng)條件下培養(yǎng),菌種長出即可使用。
培養(yǎng)方法:
‌培養(yǎng)基配制‌:
基礎(chǔ)培養(yǎng)基需含葡萄糖(20-100g/L)、酵母膏(5-10g/L)及瓊脂(15g/L),pH調(diào)至6.6-6.8(25℃)。
添加2%甲醇可顯著提高細菌纖維素產(chǎn)量,濕膜產(chǎn)量可達60g/100ml培養(yǎng)基。
培養(yǎng)條件‌:
溫度:30℃(37℃不生長)。
需氧培養(yǎng),培養(yǎng)時間4-5天。
‌操作步驟‌:
凍干粉活化:將菌粉溶解于0.2-0.3ml無菌水,全部接種至斜面培養(yǎng)基。
菌懸液制備:刮取平板菌苔制成懸液,涂布新鮮平板。
保存方法:
‌短期保存‌:
斜面或穿刺菌種:4-10℃保存,有效期3-6個月。
‌長期保存‌:
凍干粉:常溫保存2-25年,需避免反復(fù)凍融。
甘油菌:-80℃保存,使用時直接復(fù)蘇。
 
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